🔬 طريقة تحليل D.Dimar عملي
⭕#تعريف التحليل
⭕#القيمة التشخيصية للتحليل
⭕#ماهي عينة التحليل وعلى اي ماتع تجلط
⭕#التنبيهات للتحليل
⭕#طريقة عمل التحليل
⭕#القيم الطبيعية وتفسير النتيجه
⚛##D-Dimer
الأسماء الأخرى DDI , D-Dimer-P
♦الغاية من التحليل
⭕•نفي حالة التهاب الوردي الخثري العميق (deep vein thrombosiss ) و الصمة الرئوية (pulmonary embolism)
⭕•تقييم حالة التخثر المنتشر داخل الأوعية الدموية ((disseminated intravascular coagulation)
⭕•مراقبة مدى انحلال الخثرة خلال المعالة الحالة للخثرات (thrombolytic therapy)
💠العينة المطلوبة
بلازما (مسحوبة على سترات الصوديم - حصراً ) يجب أن يكون تركيز سترات الصوديم في الانبوب 3.2 % و يفضل استخدام الأنابيب المفرغة من الهواء و أن يملأ الأنبوب بالحجم المناسب من الدم (عند الإشارة الموجودة على الأنبوب). و يجب مزج الأنبوب بشكل جيد دون رجه .. ويفضل فصل البلازما عن الكريات الحمراء مباشرة بعد سحب الدم ثم حفظ البلازما مجمدة لحين البدء بالتحليل . مع العلم أنه يمكن حفظ العينة في حرارة الغرفة لمدة ثمان ساعات .
⭕•طريقة حفظ ونقل العينة
يجب حفظ العينة مجمدة حصراً
🅾•أسباب رفض العينة
العينة المنحلة، المصل، البلاسما اليرقانية، البلاسما الدهنية، العينة الملوثة ، أي عينة بلاسما غير مسحوبة على سترات الصوديوم
🔸•تحضير المريض
يفضل على معده بدون اكل
🔴•ما هو الـ D-Dimer؟
يقوم الثرومبين (Thrombin) بشطر الفيبرينوببتيد ((fibrinopeptides A and B) من الفيبرينوجين (fibrinogen) مما ينتج عن ذلك ما يسمى بـ أحاديات الفيبرين (Fibrin monomer ) و التي تحوي على المناطق (D domains ) عند كل طرف من نهايات الفيبرين الأحادي و المنطقة (E domain) في الوسط . تعمل جزيئات الفيبرين الأحادي على التجمع مع بعضها البعض لتشكل الفيبرين غير القابل للإنحلال (insoluble fibrin) أو علقة الفيبرين (fibrin clot) حيث ترتبط النهايات (D) ببعضها البعض. بعد ذلك تتثبت علقة الفيبرين أكثر من خلال الإنزيم (thrombin-activated factor XIII) الذي يقوم بعمل جسور بين جزيئات أحاديات الفيبرين.
تعمل علقة الفيبرين المتشكلة على تنشيط عملية جديدة أخرى هي انحلال العلقة الليفية (fibrinolysis ) من خلال تنشيط إنزيم الـ (plasminogen ) لكي يتحول الى الـ (plasmin ) و الذي بدوره يفكك الروابط المتشكلة بين جزيئات الفيبرين و الذي سينتج عنه في النهاية ما يسمى نواتج تفكك الفيبرين الذوابة (soluble fibrin degradation products ) و التي عادة ما تكون بأحجام مختلفة و منها قطع متصالبة من بقايا الفيبرين تدعى (D-dimer). كذلك يعمل الـ (Plasmin ) على تفكيك الفيبرين الى القطع التالية (fragments X, Y, D, and E). يتم تحديد مستوى الـ ( D-dimer) من خلال ربطه بالأضداد النوعية به مما يزيد من عكارة وسط التفاعل و بالتالي كلما زادت نسبة العكارة في وسط التفاعل دل ذلك على ارتفاع مستوى جزيئات الـ (D-dimer ).
⏳•طريقة القياس
المقايسة المناعية بالعكارة (Immunoassay Turbidimetric)
⏳•طريقة ثانية
العينه المطلوبة: عينة دم مع مانع تخثر سترات الصوديوم (0.55 سترات الصوديوم + 4.5 عينة دم) = ثم الحصول على عينة البلازما
⌛الطريقه
⭕1- نعمل تخفيفات لعينة البلازما "Titration”وذلك لنتعرف على قوة الجلطه... قويه / متوسطه/ ضعيفه باتباع الخطوات التاليه
احضر 3 انابيب نرقمهم
في tube-1 : وضع 100 ميكرو من البلازما مع 1مل من pufferr وعمل mix
في tube-2: نضع ½ مل من puffer لوحده + 100 ميكرو من مزيج ال tube-1 ونعمل mix
في tube-3 : نضع ½ مل من puffer لوحده + 100 ميكرو من مزيج ال tube-2 ونعمل mix ثم يتم التخلص من 100 ميكرو منه
⭕ 2- نحضر شريحه خاصه : نضع 50 ميكرو (1 drop) من (البلازما + puffer : من ال tube-1) في دائرة المتواجده في الشريحه نكرر هذة الخطوه ولكن باستخدام عينة من tube-2 على دائره اخرى وكذلك بالنسبه للعينه الماخوذه من tube-3ثم نضيـــــ+ــــــف لكل عينه منهم مقدار 50 ميكرو (1 drop) من reagent وهو عبارة عن Antibodies-D.dimer ثم نعمل mix للعينه وننتظر فترة حضانه مقدارها 3 دقائق
⭕ 3- نراقب النتيجه :
اذا شاهدنا تخثر للعينه : فهي تحتوي على D.dimer فنحدد عندها التخثر حصل باي تخفيف
اما اذا لم نشاهد تخثر فهي لا تحتوي على D.dimer
⭕ 4-سجل النتيجه ونظف المكان
💮•القيم الطبيعية
<0.4 μg/mL.
♦•العوامل التي تؤثر على نتيجة التحليل
◦ يزداد مستوى الـ (d-Dimer ) مع
◦ زيادة مستوى الواسم السرطاني (CA 125 ) في سرطانات المبيض
◦ العامل الرثياني الإيجابي (rheumatoid factors)
◦ الصدمة الكهربائية القلبية electrical cardioversion
◦ المعالجة بالـ (letrozole ) في حالات المتقدمة من
سرطان الثدي
◦ بعد العمليات الجراحية surgery و الأذيات الرضية ((traumatic injury)
•⭕•ملاحظات أخرى
يمكن أن يرتفع مستوى الـ (D-dimerr) في البلاسما في حالات سريرية أخرى و هي بالتالي ليست نوعية لأي حالة مرضية خاصة (إذا ما أخذت لوحدها ) و بالتالي يجب أخذ الحالة السريرية و الفحوصات المخبرية الأخرى بعين الاعتبار عند التشخيص السريري
🔬🔬
ليست هناك تعليقات:
إرسال تعليق